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實(shí)驗(yàn)技術(shù)服務(wù)
動(dòng)物模型構(gòu)建
大鼠慢性坐骨神經(jīng)痛模型構(gòu)建
上海申知心致力于臨床前藥效學(xué)CRO實(shí)驗(yàn),大鼠慢性坐骨神經(jīng)痛模型構(gòu)建主要采用坐骨神經(jīng)慢性壓迫損傷
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動(dòng)物選擇:健康SD大鼠,雄性,6-8周齡,體重180-250g。
麻醉:常用麻醉劑包括異氟烷吸入麻醉、戊ba比妥鈉(40 mg/kg腹腔注射)或10%水合氯醛(0.3-0.4 ml/100g腹腔注射)。
備皮與消毒:剃除左后肢或右后肢毛發(fā),碘酒和75%乙醇消毒手術(shù)區(qū)域。
暴露坐骨神經(jīng):沿股骨長軸偏后側(cè)切開約1 cm皮膚,鈍性分離肌肉,暴露坐骨神經(jīng)主干。
神經(jīng)結(jié)扎:
使用4-0鉻制羊腸線或絲線,在坐骨神經(jīng)主干上均勻結(jié)扎4道,間隔1 mm。
結(jié)扎松緊度:以引起后肢肌肉輕微顫動(dòng)為宜,避免wan全阻斷神經(jīng)血供。
假手術(shù)對(duì)照:僅暴露神經(jīng)而不結(jié)扎。
縫合與消毒:逐層縫合肌肉和皮膚,術(shù)后注射青霉素(10萬U/d,連續(xù)4天)預(yù)防感染。
恢復(fù)觀察:單籠飼養(yǎng),觀察步態(tài)異常、足背觸地、肌肉wei縮等疼痛表現(xiàn)。
行為學(xué)檢測(cè):
機(jī)械痛閾(MWT) :使用Von Frey纖維絲測(cè)定縮足反應(yīng)閾值,術(shù)后4-7天閾值顯著降低表明模型成功。
熱痛閾(TWL) :通過熱板試驗(yàn)或輻射熱刺激測(cè)量縮足潛伏期,潛伏期縮短提示痛覺過敏。
病理與分子指標(biāo):
坐骨神經(jīng)水腫、空泡變性及炎性細(xì)胞浸潤。
血清IL-1β、TNF-α等炎性因子升高,脊髓內(nèi)cGAS/STING通路激活。
結(jié)扎一致性:松緊度需嚴(yán)格控制,避免過度結(jié)扎導(dǎo)致神經(jīng)wan全損傷。
操作規(guī)范:文獻(xiàn)報(bào)道因操作失誤可能導(dǎo)致動(dòng)物死亡,需由經(jīng)驗(yàn)豐富人員操作。
模型局限性:CCI模型疼痛反應(yīng)約持續(xù)2個(gè)月,10-14天達(dá)高峰,相比SNL模型更易操作但穩(wěn)定性稍差。